8% SDS-PAGE预混快速凝胶试剂盒(彩胶)
产品包装:
产品编号 | 盒内编号 | 产品内容 | 包装规格 |
PE003 | PE003A | 分离胶溶液 | 125mL |
PE002B | 分离胶缓冲液 | 125mL | |
PE002C | 浓缩胶溶液 | 50mL | |
PE002D | 浓缩胶缓冲液 | 50mL | |
PE001E | 过硫酸铵 | 0.5g | |
/ | 说明书 | 1份 |
产品简介:
本产品是在传统的 SDS-PAGE 凝胶试剂盒的基础上改良的一种新型蛋白电泳凝胶试剂盒。其特点在于在不改变传统使用习惯和蛋白质分子的电离环境的基础上,改善了引发剂过硫酸铵的使用条件,简化了凝胶的制备方法并提高了电泳的速度,有利于获得更完美的蛋白电泳实验结果。
保存条件:
2~8°C保存,其中10%过硫酸铵溶液分装后保存于-20°C。
操作流程:
试剂准备
1.1第一次使用前取5ml去离子水加入过硫酸铵(APS)试管中,适当震摇,混匀后置于2-8°C备用,长期不用建议保存于-20°C。
分离胶的制备
2.1根据实验使用的制胶模具,分别取需要量1/2体积的PE003A分离胶溶液和PE002B分离胶缓冲液,加入一个小烧杯(试管)中混匀备用;
例如:使用伯乐Mini-PROTEAN电泳槽制胶时,每块0.75/1.0/1.5mm的胶,分离胶溶液液与分离胶缓冲液分别取2.0/2.5/3.8ml。
2.2按照1:100的比例在制备的分离胶混合液加入10% APS溶液(即1ml凝胶混合液中加入10μl 10% APS溶液),轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡;
2.3 将预混好的分离胶溶液注入制胶玻璃板中,随后,加入适量水或醇(如异丙醇、正丁醇等)覆盖于下层胶之上。
2.4 室温放置15-30min。
浓缩胶的制备
3.1在等待分离胶凝固时,另取一个小烧杯,分别取浓缩胶需要量1/2体积的PE002C浓缩胶溶液与PE002D浓缩胶缓冲液,混匀后备用;
例如:使用伯乐Mini-PROTEAN电泳槽时,每块0.75/1.0/1.5mm的胶,PE002C浓缩胶溶液与PE002D浓缩胶缓冲液分别取0.8/1.0/1.5 ml。
3.2按照1:100的比例在浓缩胶混合液中分别加入10% APS溶液(即1ml凝胶混合液中加入10μl 10% APS溶液),轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡;
3.3观察分离胶凝固后,弃去上层的水封层(或醇封层),在制胶玻璃板中灌入适量上一步骤准备的浓缩胶混合液;
3.4将梳子插入凝胶内,静置10~15分钟,等待凝胶聚合;
注:制备好的凝胶放入加有少量电泳缓冲液的密封袋中,可于4°C存放数周。
4、电泳操作
4.1待凝胶聚合后,组装电泳槽,加入电泳缓冲液,小心地拔出梳子,检查胶孔并整理梳齿。
4.2 根据实验需要加入蛋白样品和蛋白分子量标准。
4.3调整电泳仪为恒压100-200v,进行电泳操作,完成蛋白电泳实验。
注意事项
1. 配制的过硫酸铵应存储于-20°C,若保存于4°C,只能使用一周;
2. 本试剂盒在分离胶缓冲液和浓缩胶缓冲液中已加入SDS。
温馨提示
1. 为了您的自身安全,使用试剂前,请做好防护,如穿实验服,带手套等。
2. 试剂中含有Acr-Bis,该试剂有神经毒性,小心使用。